mRNA差异显示技术的研究进展及其在植物研究中的应用

综述了mRNA差异显示技术的原理、技术路线、优缺点以及差异显示技术的改进过程,并对其在植物发育、植物抗性机理、植物杂种优势机理以及植物激素诱导的基因表达等植物研究领域中的应用作了简要的介绍.     

肝窦内皮细胞和枯否细胞中bcl-2和GAPDH mRNA半衰期的测定

通过反转录 PCR( RT- PCR)测定了肝窦内皮细胞和枯否细胞中 bcl- 2和 GAPDH m RNA的半衰期。结果表明 ,在窦内皮细胞中 bcl- 2和 GAPDH m RNA的半衰期分别为 6 .13和大于 2 0 h,在枯否细胞中 bcl- 2和GAPDH m RNA的半衰期分别为 5 .86和 13.74h。     

环境低温对肉鸡肺小动脉壁c-jun mRNA表达的影响

研究环境低温诱发肉鸡肺动脉高压综合征(PHS)过程中肺小动脉壁c-junmRNA的表达变化,从而确定原癌基因c-jun在环境低温诱发肉鸡PHS过程中的参与作用,为肉鸡PHS发生机制的研究提供基础。160只雄性AA商品代肉鸡15日龄随机分为对照组(22±1.5)℃和低温组(11±2)℃。15~50日龄,每周每组随机取6只,做肺组织石蜡切片,应用原位杂交染色法进行c-junmRNA杂交,并结合图像分析法,测定对照组与低温组肉鸡肺小动脉壁原癌基因c-junmRNA的表达情况。1)低温组肉鸡PHS发生率(18.75%)极显著高于对照组(1.25%)(P<0.01);2)低温组肉鸡肺小动脉壁c-junmRNA的表达从22日龄开始较对照组明显增加(P<0.05),从29~50日龄较对照组极显著升高(P<0.01)。说明环境低温明显诱发了肉鸡肺小动脉壁c-junmRNA的表达,且c-junmR-NA的表达参与了环境低温诱发的肉鸡PHS的发生。     

mRNA差异显示技术在分离水稻抗性基因中的应用

mRNA差异显示技术从问世至今,在分离水稻抗性基因中得到了广泛的应用,通过对差异表达基因进行分析,能够进一步阐明水稻的抗性机理.对近年来mRNA差异显示法分离水稻抗性基因的研究做了总结,并从引物改进、PCR退火温度、dNTP浓度的改进、胶浓度的选择、标记方法的改进和差异片段验证方法的改进7个方面对mRNA差异显示技术的优化做了简单阐述.     

QSA的mRNA在人和小鼠各组织中表达规律

从基因水平上检测精子中新基因QSA的表达规律及时空分布,并推测其可能的生物学作用.采用RT-PCR和原位杂交法检测QSA在人和小鼠多种组织中的表达.RT-PCR结果显示QSA在小鼠的睾丸、精子和受精卵中特异性表达,而在小鼠卵细胞、囊胚等组织中未检测到该基因的mRNA.原位杂交结果表明QSA在人的部分腺体组织(如:睾丸、...     

仔猪海马结构及其周围皮质内生长抑素mRNA的分布

用原位杂交组织化学法研究了５头仔猪海马结构及其周围皮质内生长抑素ｍＲＮＡ的分布。结果表明生长抑素ｍＲＮＡ主要分布于海马的始层和齿状回的多形层，偶见于海马的辐射层和锥体细胞层，此外，在内溴区和海马旁回内也见到标记细胞，主要位于深层。     

银狐生长激素成熟mRNA真核表达载体的构建

用PCR方法，从含有银狐生长激素mRNA的阳性重组质粒pMD18-T-IGH中亚克隆出生长激素基因，然后定向插入到真核表达载体pcDNA3．1( )中，通过酶切、质粒PCR和序列测定对质粒进行鉴定表明，成功构建了银狐生长激素成熟mRNA真核表达质粒pcDNA3．1-IGH．     

保护剂减轻氯嘧磺隆对玉米残留药害的作用机理

采用沙培方法,利用生理生化试验及半定量PCR方法,研究了保护剂HN对玉米ALS、GSTs活性及GSTs的mRNA表达量的影响。结果表明,保护剂对6个玉米品种的ALS、GSTs均具有诱导作用,但对不同品种的诱导增加百分率却不同。对氯嘧磺隆敏感的玉米东甜3号的GSTs诱导增加百分率达到59.18,对其ALS的诱导倍数为叶部1.29倍,根部2.30倍;对氯嘧磺隆耐性较高的玉米屯玉88GSTs诱导增加百分率为19.26,其ALS的诱导倍数为叶部1.07倍,根部2.07倍。氯嘧磺隆和保护剂均可以诱导玉米GSTsmRNA的相对表达量的增加,保护剂的诱导作用更强。     

不同来源木聚糖酶对黄羽肉鸡小肠绒毛形态结构和黏膜生长抑素mRNA表达的影响

本文旨在比较研究小麦型饲粮中添加不同来源木聚糖酶对黄羽肉鸡小肠绒毛形态结构和黏膜生长抑素(SS)mRNA表达的影响.选择22日龄、体重相近的健康黄羽肉鸡375羽,随机分成3个组,每组5个重复,每重复25羽.对照组饲喂小麦型基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别饲喂在基础日粮中添加250 mL/t真菌性和细菌性木聚糖酶的试验饲粮,试...